《植物生理学报》 2004, 40(4): 483-486

萝卜总 R N A 提取与 m R N A 差异显示技术

黄浩^1,2 柳李旺^1,* 龚义勤¹ 陈崇顺² 宋贤勇¹ 朱献文¹

1 南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室，园艺学院，南京 210095；2 南京师范大学生命科学学院，南京210097

通信作者：柳李旺；E-mail: nauliulw@njau.edu.cn；Tel: 025-84395563

摘　要：

以萝卜幼小花药与叶片为材料，初步建立了 mRNA 差异显示技术体系。4 种提取总 RNA 方法中，改进的 SDS/ 酸 酚法比 CTAB/ 酸酚法和 SDS / 碱酚法更合适；改进的热硼酸法(HB)提取的 RNA 质量也较高，但所需时间较长，成本较 高。以改进的 SDS / 酸酚法获得的 RNA 进行纯化后，其 OD260/OD280 在 2.0~2.2 之间， 表明 RNA 样品杂质较少；总 RNA 进行反转录与差异显示分析表明，高分辨力的 cDNA 片段在 100~380 bp 之间。

关键词：萝卜；差异显示技术；基因表达

收稿：2003-12-29   修定：2004-04-19

资助：国家自然科学基金(30300238)、江苏省自然科学基金(创新人才 BK2004418)、上海市科技兴农重点攻关(农科攻字 1-4)项目。

萝卜总 R N A 提取与 m R N A 差异显示技术

黄浩^1,2 柳李旺^1,* 龚义勤¹ 陈崇顺² 宋贤勇¹ 朱献文¹

1 南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室，园艺学院，南京 210095；2 南京师范大学生命科学学院，南京210097

Corresponding author: ; E-mail: nauliulw@njau.edu.cn; Tel: 025-84395563

Abstract:

以萝卜幼小花药与叶片为材料，初步建立了 mRNA 差异显示技术体系。4 种提取总 RNA 方法中，改进的 SDS/ 酸 酚法比 CTAB/ 酸酚法和 SDS / 碱酚法更合适；改进的热硼酸法(HB)提取的 RNA 质量也较高，但所需时间较长，成本较 高。以改进的 SDS / 酸酚法获得的 RNA 进行纯化后，其 OD260/OD280 在 2.0~2.2 之间， 表明 RNA 样品杂质较少；总 RNA 进行反转录与差异显示分析表明，高分辨力的 cDNA 片段在 100~380 bp 之间。

Key words: 萝卜；差异显示技术；基因表达